不同物種來源的抗體定制,在后續實驗應用中有什么差異?
日期:2025-10-30 14:13:04
抗體的物種來源直接影響后續實驗的兼容性和結果準確性。不同物種來源的定制抗體(如兔源、鼠源),在應用差異上主要體現在交叉反應風險、二抗選擇限制、實驗方法適配性和免疫原性四個核心維度。
1.交叉反應風險不同,影響檢測特異性
鼠源抗體:由于小鼠與部分哺乳動物(如人、大鼠)的親緣關系較近,其抗體識別的抗原表位可能在不同物種間高度保守,容易與樣本中其他同源蛋白發生交叉反應,可能導致檢測假陽性。
兔源抗體:兔的進化路徑與多數實驗動物差異更大,其免疫系統更容易識別到抗原的特異性表位,產生的抗體交叉反應風險相對較低,在檢測復雜樣本(如多物種混合樣本)時,特異性通常更優。

2.二抗選擇受物種限制,影響實驗兼容性
二抗的物種來源需與一抗嚴格匹配,不能隨意替換。例如使用鼠源一抗時,后續必須選擇抗鼠的二抗(如goatanti-mouseIgG);使用兔源一抗時,則需選擇抗兔的二抗(如goatanti-rabbitIgG)。
若實驗中需同時檢測多個靶點(如雙標免疫熒光),需避免一抗物種來源重復:比如一個用鼠源,另一個用兔源,才能通過不同熒光標記的二抗區分信號;若兩者均為鼠源,二抗會同時結合兩個一抗,導致信號混淆。
3.適配的實驗方法不同,影響應用場景
鼠源抗體:更適合依賴單克隆抗體的實驗,如流式細胞術、免疫組化(IHC)中的特定細胞標記。但由于小鼠免疫系統對某些弱免疫原的應答較弱,定制多克隆抗體時,效價可能低于兔源。
兔源抗體:是多克隆抗體制備的優選,因其免疫系統能產生更豐富的抗體亞型,效價更高,更適合酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、免疫印跡(WB)等需要高靈敏度檢測的實驗;同時兔源抗體在免疫沉淀(IP)中,對抗原的結合親和力通常更強,能提高沉淀效率。
4.免疫原性有差異,影響體內實驗應用
若后續需進行體內實驗(如抗體藥物研發、體內成像),抗體的物種來源會影響其在宿主中的免疫原性。例如將鼠源抗體注入人體或非人靈長類動物體內,宿主可能產生抗鼠抗體(HAMA反應),導致抗體被清除,甚至引發免疫副作用。
兔源抗體在部分動物體內的免疫原性略低于鼠源,但仍需根據實驗動物物種選擇:若實驗動物為小鼠,則兔源抗體的免疫原性更高,可能干擾實驗;此時選擇同物種(鼠源)抗體更合適。






