多克隆抗體制備定制時,若僅提供目標蛋白的基因序列,服務商能否協助完成抗原的設計、表達與純化,整個抗原制備環節的周期和質量把控標準
日期:2025-09-03 09:26:57
多數服務商可基于你的目標蛋白基因序列,完成抗原設計、表達與純化的一站式制備;抗原環節常見周期為 4–12 周,主流質量要求為重組蛋白純度≥90%–95%、內毒素≤1–10 EU/μg,同時配套 HPLC、SDS?PAGE、MS 與必要的活性 / 穩定性檢測。
一、服務商能力與支持
1、可提供的設計與制備路徑:
? 重組表達:E. coli / 酵母 / 昆蟲 / 哺乳動物細胞(復雜或構象表位優先后兩者)。
? 多肽合成與偶聯:15–20 aa,末端可加 Cys,常用載體蛋白 KLH/BSA/OVA。
? 小分子半抗原需先偶聯并驗證偶聯效率。
2、信息要求:
基因 / 氨基酸序列、目標蛋白全稱與種屬;明確下游應用(WB/IHC/IF/IP/ 中和等)以便選擇表達系統與表位區域。
2、信息要求:
基因 / 氨基酸序列、目標蛋白全稱與種屬;明確下游應用(WB/IHC/IF/IP/ 中和等)以便選擇表達系統與表位區域。

二、抗原制備周期(典型)
重組蛋白表達與純化:6–12 周(含載體構建、表達優化、純化與質檢)。
多肽合成與偶聯:3–4 周(設計→合成→偶聯→質檢)。
若采用 mRNA?LNP 等替代抗原,可將抗原準備壓縮至約 3 天,顯著縮短整體周期。
三、質量把控標準(主流)
純度:SDS?PAGE≥90%–95%;HPLC/SEC評估單體與聚體。
分子量與結構:質譜確認分子量;還原/非還原SDS?PAGE、WB驗證完整性與修飾。
活性/穩定性:活性驗證(如適用)與穩定性報告;復性與折疊優化(難表達靶點)。
內毒素:重組蛋白用于免疫時通常要求≤1–10EU/μg。
交付文件:濃度、純度、分子量、內毒素、穩定性 / 活性數據與圖譜報告。
四、快速推進建議
明確應用與是否需構象表位,便于優先選擇表達系統與表位區域。
提供全長基因序列與物種信息,利于密碼子優化與載體構建。
對難表達靶點,提前評估 “多系統篩選+復性/折疊” 或 “多肽多段覆蓋” 策略。
若時間緊,詢問是否支持 mRNA?LNP 替代抗原以壓縮前期時間。
如告知你的靶點序列、物種與目標應用(如 WB/IHC/IF/IP/ 中和),我可據此給出更精確的周期與質檢指標清單,并幫你匹配合適的服務商與技術路線。