研究方法：

作者通過合成Ply_427-444肽段的變異體并進(jìn)行增殖實(shí)驗(yàn)，確定了CD4⁺T細(xì)胞克隆對特定核心表位的識別。隨后，使用四聚體染色結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)來評估CD4+T細(xì)胞在侵襲性肺炎鏈球菌病（IPD）癥狀史的供體中，對ECT特異性的反應(yīng)。

數(shù)據(jù)表明CD4⁺T細(xì)胞介導(dǎo)的針對Ply的免疫與免疫監(jiān)視和病原體消除有關(guān)。在這項(xiàng)研究中，作者發(fā)現(xiàn)HLA-DP限制性十一肽特異性是Ply導(dǎo)向的CD4⁺T細(xì)胞反應(yīng)的一個重要組成部分，能夠?qū)ο到y(tǒng)發(fā)育多樣化的細(xì)菌病原體產(chǎn)生廣泛的免疫力，這些病原體與CDC的表達(dá)有關(guān)。在肺炎球菌感染后的康復(fù)期供體，受HLA-DP限制的CD4⁺T細(xì)胞通過結(jié)構(gòu)多樣的公共和私有TCR進(jìn)行抗原保存和表位識別，并在健康供體中形成記憶細(xì)胞群體。

研究思路：

1. CD4⁺T細(xì)胞識別肺炎球菌溶血素的保守細(xì)菌表位(Ply_427–441)

Ply被認(rèn)為是包含在肺炎球菌蛋白疫苗中的潛在候選抗原。學(xué)者等通過測量人外周血單核細(xì)胞(PBMC)樣本中的抗原特異性增殖反應(yīng)來評估dPly的免疫原性。作者在健康供體中鑒定出三個免疫原性肽庫，使用這些庫中的單個肽、進(jìn)一步篩選表明，S083-24(Ply_427-444)引發(fā)的增殖反應(yīng)與dPly觀察到的增殖反應(yīng)相當(dāng)。健康供體中針對Ply_427-444的CD4⁺T細(xì)胞反應(yīng)普遍存在，表明在多種或常見的HLAII類同種異形體的背景下存在抗原呈遞。

進(jìn)一步研發(fā)證明跨越dPly十一肽區(qū)域的高度免疫原性CD4⁺T細(xì)胞表位，其引發(fā)受HLA-DPB1*02和/或HLA-DPB1*04限制的功能多樣化反應(yīng)。

CD4⁺T細(xì)胞通過識別和與這個抗原表位相互作用，激活免疫反應(yīng)。針對肺炎鏈球菌（肺炎球菌）的CD4⁺T細(xì)胞介導(dǎo)免疫反應(yīng)可以保護(hù)免受細(xì)菌再次寄生和侵襲性肺炎鏈球菌病（IPD）的影響。

2. 在HLA-DPB1*04的背景下，Ply427–441被結(jié)構(gòu)多樣的TCR識別

為了建立Ply十一肽免疫識別的分子基礎(chǔ)，作者將HLA-DP*04/ECT四聚體結(jié)合CD4⁺T細(xì)胞進(jìn)行索引排序(圖2F)并對表達(dá)的TCR進(jìn)行測序，數(shù)據(jù)顯示CD4⁺T細(xì)胞識別Ply十一肽表位并通過多種TCR進(jìn)行抗原結(jié)合。通過親和力（KD）和動力學(xué)測量，Ply_427–441與HLA-DP4形成復(fù)合物，具有高度特征性表位。

CD4⁺T細(xì)胞通過識別和與這個抗原表位相互作用，激活免疫反應(yīng)。針對肺炎鏈球菌（肺炎球菌）的CD4⁺T細(xì)胞介導(dǎo)免疫反應(yīng)可以保護(hù)免受細(xì)菌再次寄生和侵襲性肺炎鏈球菌病（IPD）的影響。

3. Ply_427–441由全球廣泛存在的HLA同素異形體DPB1*02和DPB1*04呈現(xiàn)

通過HLA-DP4-Ply_427-441復(fù)合物中共享與特有TCR的接口比較，作者鑒定出了針對肺炎鏈球菌表位，Ply_427-444的共享和特有CD4⁺T細(xì)胞克隆類型，這一表位具有高度免疫優(yōu)勢且由廣泛存在的人類白細(xì)胞抗原（HLA）DPB1*02和DPB1*04呈遞。這表明在不同個體中存在共同的CD4⁺T細(xì)胞克隆類型，對這個特定的肺炎鏈球菌表位具有免疫應(yīng)答作用。

4. 相關(guān)表位的交叉識別可以產(chǎn)生跨界細(xì)菌免疫

研究還得出新的結(jié)論，針對Ply的CD4⁺T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)在免疫監(jiān)視和病原體消除中起重要作用。HLA-DP限制的十一個肽基序列特異性是針對Ply的CD4⁺T細(xì)胞應(yīng)答的主要組成部分，使得這種免疫應(yīng)答能夠?qū)DCs表達(dá)的不同進(jìn)化類群細(xì)菌病原體進(jìn)行有效識別。

這些發(fā)現(xiàn)為應(yīng)對威脅生命的細(xì)菌性傳染病，包括IPD在內(nèi)的疾病預(yù)防和治療策略提供了重要信息，并揭示了特異性CD4⁺T細(xì)胞在免疫保護(hù)中的關(guān)鍵作用和機(jī)制。

結(jié)論：

由于通過普遍存在的人類白細(xì)胞抗原（HLA）分型DPB1*02和DPB1*04呈遞，并且通過結(jié)構(gòu)多樣的T細(xì)胞受體（TCR）識別，研究表明這種免疫優(yōu)勢的CD4⁺T細(xì)胞表位具有廣泛的免疫原性。此外，Ply_427-444的免疫原性是由保守的十一個肽鏈區(qū)域（ECTGLAWEWWR）中的核心殘基支持的，這使得它能夠交叉識別表達(dá)CDCs的異源細(xì)菌病原體。分子研究進(jìn)一步顯示，HLA-DP4-Ply_427-441與特有和共享的TCR之間的結(jié)合方式相似。總的來說，這些發(fā)現(xiàn)揭示了近乎全球性的免疫反應(yīng)集中于一個跨菌屬的細(xì)菌表位的機(jī)制決定因素，這可能為應(yīng)對包括IPD在內(nèi)的各種威脅生命的傳染性疾病提供輔助治療策略的信息。